جداسازی و شناسایی سویه تولیدکننده آنزیم فسفولیپاز از پساب صنعت روغن و جهش‌ آن

در پژوهش حاضر گونه‌های مختلف تولید کننده آنزیم فسـفولیپاز از پساب صنعت روغن جداسازی و در نهایت سـویه قارچی ZB-ZH 192 Tricoderma atroviride شناسایی و جهت ادامه بررسی‌ها انتخاب گردید. جهت افزایش میزان فعالیت آنزیم، سویه منتخب تحت جهش تصادفی توسط پرتودهی با اشعه گاما در دزهای Gy 200، 400، 600 و 800 قرار گرفت. مقایسه میزان فعالیت آنزیم سویه جهش‌یافته با نوع وحشی نشان داد که دز Gy 400 اشعه گاما سبب ایجاد جهش پایدار همراه با افزایش میزان فعالیت فسفولیپاز و توده‌زیستی، به ترتیب از 96/1 به U/mL/3 و g/L13/8 به g/L 17/13 شده ‌است. به منظور غربالگری و بررسی اثر فاکتورهای مختلف بر میزان توده زیستی و فعالیت فسفولیپاز سویه جهش‌یافته منتخب، از طرح پلاکت - برمن با هفت متغیر دما، زمان، میزان فسفولیپید سویا (به عنوان منبع کربنی)، میزان پپتون (به عنوان منبع نیتروژنی)، نسبت مساوی از منو و دی‌پتاسیم‌هیدروژن فسفات (به عنوان منبع فسفر)، درصد تلقیح و سن تلقیح، در دو سطح، توسط نرم‌افزار JMP استفاده گردید. نتایج نشان داد که سطوح بالای متغیرهای زمان، دما و فسفولیپید سویا به عنوان منبع کربنی اثر معنی‌داری بر میزان فعالیت آنزیمی داشتند، در حالی‌که متغیرهای میزان پپتون به عنوان منبع نیتروژنی و زمان، بر تولید توده زیستی تأثیر معنی‌دار نشان دادند.